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比氏腸微孢蟲PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:APT檢測(cè)試劑盒 石斛堿Dendrobine2115-91-5水飛薊賓Silibinin22888-70-6
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱 | 比氏腸微孢蟲PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 |
英文名稱 | Enterocytozoon bieneusi PCR |
貨號(hào) | LZP6701 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
人雌激素受體β(ESR2)elisa試劑盒Anti-DGKB Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 生長(zhǎng)因子和激素
人β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)elisa試劑盒Anti-DGKZ Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
人Coll2-1 elisa試劑盒Anti-DHPS Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物
犬β內(nèi)啡肽(β-EP)elisa試劑盒Anti-DHPS Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞類型標(biāo)志物 新陳代謝 線粒體
馬黃體生成素(LH)elisa試劑盒Anti-DGKK Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 干細(xì)胞
雞白介素4(IL-4)elisa試劑盒Anti-DHRS11 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物
大鼠活化素A(ACV-A)elisa試劑盒Anti-DHRS4 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
大鼠丙二酸單酰輔酶A脫羧酶(MLYCD)elisa試劑盒Anti-DHX8 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)elisa試劑盒Anti-DHX8 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝
大鼠apelin 13(AP13)elisa試劑盒Anti-DIABLO Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
猴子白介素8(IL-8/CXCL8)elisa試劑盒Anti-DIAPH2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
猴腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒Anti-DIRAS1 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué)
猴前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)elisa試劑盒Anti-DLC1 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué)
鹿胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)elisa試劑盒Anti-DIO3 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體
狗微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)elisa試劑盒Anti-DKC1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 新陳代謝
二鄰羥苯基大乙酸鐵鈉 2-甲氧基-3-甲基吡嗪 4-
7-基吲哚啉 硫代丁酸甲酯 異辛酸鈉
2,4,5-三苯磺酰 二糠基二硫 異
卡維地洛 2-甲氧基-3-異丁基吡嗪 N-乙氧羰基鄰苯
7664-41-7
NA 質(zhì)氮氧化物(劑)標(biāo)樣
NA 質(zhì)凱氏氮標(biāo)樣
NA 質(zhì)陰離子表面活性劑標(biāo)樣
大鼠脂蛋白脂肪酶(LPL)ELISA試劑盒 ,英文名: LPL ELISA Kit
人甲狀腺抗體(TAb)ELISA檢測(cè)試劑盒HumahyroidAibody,TAbELISAKit 96T/48T
大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒 Rat leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit
CLIAKitfoIEG1ELISAKit大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1規(guī)格:48T/96T
全組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒10次
ELISAKitEHF人抗流行性出血熱病毒抗體IgM規(guī)格:48T/96T
比氏腸微孢蟲PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Glycated hemoglobin A1c,A1c ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse glucocorticoid receptor,GR ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse glycogen synthase kinase,GSK ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit*
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Glycogen phosphorylase II,GP-II ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit*
小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse ferritin,FE ELISA Kit*
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。